蒙娜丽莎所用画法是西方世界首创的油画画法。从欧洲油画发展史的角度看，油画是从蜡画法、蛋胶画法上逐渐地发展起来的。这种绘画的方式叫做“晕涂法”。

这幅画包含40层超薄油彩，而且达芬奇可能把油彩先是涂在了指头之上。这才在作品脸部发现又不同层次和成分和颜料排列和分布，还有一点让人非常惊奇，这40层油料每一层的厚度仅相当于头发的五十分之一。这才使得整幅画感觉在笑，但是仔细观看笑容就会消失。