1、看线。天然的一线药师珠的线是自然形成的，是一条完整、平整的线，而人工做的非天然的线会出现接口，有分叉。由于玛瑙硬度较大，做假的一线只要用利器或者直接反复划一下就应可以鉴别出，假的一线会出现划痕有甚者会直接脱落。

2、看孔道。用强光手电照到孔道里面，天然一线药师珠的线是贯穿整个珠子，从孔道里能看到中间的线。

3、砸碎看。天然一线药师珠的线是随珠子一块长大的，并不是只在表面有线，所以砸开珠子就会明显看到生长在肉里的白线，人工在后天画上去的线只在表皮。